SOP文件 | 链球菌属纸片扩散法药物敏感试验操作规程
1 目的
规范链球菌属纸片扩散法药物敏感试验操作规程，确保药敏结果的准确。
2 适用范围
本操作规程适用于链球菌属细菌。
3 选药原则
3.1 根据CLSI M100-S19对链球菌属纸片扩散法药物敏感试验的要求。
3.2 卫生部细菌耐药监控网每年发布的监控要求。
3.3 本单位抗生素的使用情况。
4 质控
纸片药敏试验应使用肺炎链球菌ATCC 49619进行质量控制，质控菌株可接受的抑菌圈范围参见CLSI M100-S19。
5 材料和仪器
加5%羊血的MHA培养基、无菌生理盐水、药敏纸片、无菌棉签、35℃孵育箱、测量尺、标准比浊管或比浊仪。
6 操作步骤
参见《药物敏感性试验标准操作规程》。
7 判断标准
链球菌属细菌纸片扩散试验判断标准
药敏纸片 | 判断标准（mm） | 备注 | ||
敏感（S） | 中介（I） | 耐药（R） | ||
青霉素（10μg） | ≥24 | 参见结果解释9.1 | ||
头孢曲松（30μg） | ≥24 | |||
红霉素（15μg） | ≥21 | 16 ~ 20 | ≤15 | 参见结果解释9.24、9.3 |
克林霉素（2μg） | ≥19 | 16 ~ 18 | ≤15 | 参见结果解释9.24、9.3 |
万古霉素（30μg） | ≥17 | |||
左氧氟沙昨星（5μg） | ≥17 | 14 ~ 16 | ≤13 |
8 注意事项
抑菌圈直径量取的范围为包括药敏纸片在内的被药物完全抑制的区域（肉眼判断）。量取时应打开药敏平板盖子，用反射光源，用肉眼观察，从上测量抑菌圈直径。测量区域应为肉眼观察无明显可见菌落生长的区域，忽略只有用放大镜才能观察到的位于抑菌圈外缘的细菌菌落。
9 结果解释
9.1 对青霉素敏感的链球菌菌株可以认为对氨苄西林、阿莫西林、阿莫西林-克拉维酸、氨苄西林-舒巴坦、头孢克洛、头孢唑啉、头孢迪尼、头孢吡肟、头孢罗齐、头孢噻肟、头孢布坦（仅对A群链球菌）、头孢曲松、头孢呋新、头孢泊肟、头孢唑肟、头孢噻吩、头孢吡肟、厄他培南、亚胺培南、洛拉卡比、美罗培南等抗菌药敏感，无需对这些抗菌进行药物敏感试验。
9.2 青霉素和氨苄西林被推荐用于B群链球的围产期预防用药。头孢唑啉被推荐用于非严重青霉素过敏的妇女治疗，严重过敏的病人应使用红霉素或克林霉素。B群链球对氨苄西林、青霉素和头孢唑啉敏感，但可能会对克林霉素和（或）红霉素的药物敏感试验并报告结果。
9.3 红霉素耐药，克林霉素敏感的菌株应检测菌株对克林霉素的诱导耐药性，对克林霉素的诱导耐药性可通过“D”试验进行确认，即将红霉素和克林霉素纸片间隔15 ~ 26mm，35℃孵育16 ~ 18小时观察结果，如克林霉素抑菌圈在朝向红霉素纸片的方向出现“D”型变化，该菌株对克林霉素诱导耐药的菌株，该菌株对克林霉素的药敏结果应修正为耐药。
10 相关文件及记录表格
CLSI.Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing,Nineteenth Intormational Supplement.CLSI document M100-S19.Wayne,PA:CLlinical PA: Clinical and Laboratory Standards Institute,2009
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